晶泰药物信息池信息周报2016年9月
信息摘要
1、溶出曲线、参比制剂及对应法规要求（亦度正康）
2、肿瘤免疫之NK细胞篇——抗体药物or细胞治疗（千颂伊/郭药渡）
3、浅谈液相色谱柱的选择（曾澄澄药渡）
4、Harvoni等9个丙肝新药遭FDA黑框警告：可导致乙肝病毒再活化（医药魔方医药魔方数据）
5、再鼎医药引进爆红PARP抑制剂Niraparib的中国开发权利（无名医药魔方数据）
6、两票制后，药企25个业务模型！（赛柏蓝）
7、III期临床研究证实：完全切除的III期黑色素瘤患者通过Yervoy治疗改善生存获益（药渡）
1、溶出曲线、参比制剂及对应法规要求
一、溶出曲线
1.溶出曲线的作用
国外最早利用溶出曲线进行制剂的内在质量研究，并在进行生产场地变换、处方工艺改变等变更时利用有区分性的溶出曲线进行药品批间质量的把控及质量标准的提升，保证持续生产出等效的产品。在仿制药一致性评价过程中，溶出曲线作为体外测定的重要研究内容，用于评价仿制药与参比制剂质量的一致性，降低生物不等效的风险。
2.CFDA法规要求
CFDA近期在溶出曲线方面的法规有两个，分别针对体外溶出曲线研究和溶出仪的机械校验。
.3.18CFDA正式公布了《普通口服固体制剂溶出曲线测定与比较指导原则》，该指导原则适用于仿制药一致性评价中普通口服固体制剂的体外研究工作。
.4.29CFDA正式公布了《药物溶出度仪机械验证指导原则》，该指导原则详细规定了一致性评价中所使用溶出度仪机械验证的各项技术要求，包括水平度、垂直度、温度、同轴度、转速等多个参数，从源头上保证体外溶出研究数据的准确性和重现性。
二、参比制剂
1.参比制剂遴选的原则
首选国内上市原研药品（原研地产化药品需先证明与原研药品一致），其次选用国内上市国际公认的同种药品。其中国际公认的同种药物定义为在欧盟、美国、日本获准上市并获得参比制剂地位的仿制药。
2.原5类药品的参比制剂选择
CFDA年发布的化学药品新注册分类中对于仿制药的要求与FDA一致，即仿制药必须与原研药具有相同活性成分、相同剂型、相同给药途径、相同规格；对于改良后增加规格的，需按新药受理。
改规格药品的评价包括药学和临床试验等多个方面的内容。满足一定条件的情况，可以选择原研同品种其他规格为参比制剂，以相同剂量给药，进行人体生物等效性试验；不满足条件的改规格药品，建议采用临床试验进行评价。
国内上市改剂型、改酸根、碱基的制剂，如何选择参比制剂，目前仍无明确的指导原则出台。
“找不到且无法确定参比制剂的，需开展临床有效性试验的仿制药”。对照药一般可分为安慰剂对照和阳性对照药。
3.参比制剂备案的程序
药品生产企业、行业协会、原研企业及国际公认的同种药物生产企业分别通过备案、推荐和申报的途径向一致性评价办公室提交规定的表格和资料，对审核确定的参比制剂信息，及时向社会发布，药品生产企业原则上应选择公布的参比制剂开展一致性评价。
4.CFDA法规要求
.3.18CFDA正式公布了《普通口服固体制剂参比制剂选择和确定指导原则》，该指导原则适用于普通口服固体制剂仿制药质量和疗效一致性评价用参比制剂的选择和确定。
.5.19CFDA正式公布了《仿制药质量和疗效一致性评价参比制剂备案与推荐程序》，进一步明确了申请人或推荐人通过备案、推荐、申报等方式，选择参比制剂的过程。
.9.13CFDA发布了《仿制药质量和疗效一致性评价改规格药品评价一般考虑（征求意见稿）》，适用于仿制药质量和疗效一致性评价中改规格药品的评价。
.9.14CFDA发布了《总局办公厅公开征求仿制药质量和疗效一致性评价临床有效性试验一般考虑的意见》，主要适用于“找不到且无法确定参比制剂的，需开展临床有效性试验的仿制药”。
2、肿瘤免疫之NK细胞篇—抗体药物or细胞治疗
今年一月份，位于法国马赛的InnatePharma公司和Sanofi签订了总额达4.5亿美元的合作协议，用于开发靶向NK细胞治疗肿瘤的双特异性抗体，其中靶向NK细胞靶点为NKp46。在此之前的年7月，NantKwest成功登陆纳斯达克，这个以NK细胞免疫治疗为核心技术平台的公司，上市首日暴涨39%，市值当日高达27亿美元。更让人羡慕嫉妒很的是，这个公司只有11名员工，当时人均价值超过两亿美元。
NK细胞简述
在人体内NK细胞主要特征为CD3-CD56+淋巴细胞群，其中血液中主要为CD16+CD56dim亚型。NK细胞作为天然免疫系统的重要组成部分，在清除衰老细胞、病原微生物入侵时发挥着重要作用。由于NK细胞不同于T细胞和B细胞，缺少更多的基因重排过程。因此NK细胞不像T细胞一样通过特异性TCR识别靶细胞，而是通过胚系基因表达的受体识别靶细胞。为了避免对健康组织细胞造成误伤，NK细胞通过表达KIRs(immunoglobulin(Ig)-likereceptors)、CD94–NKG2和MHCI-peptide结合来负调控活性。当NK细胞识别MHC所呈递peptide为自身抗原肽时，启动抑制信号，阻止NK对自身健康细胞的杀伤(图1-a)。一旦肿瘤细胞或其他损伤的细胞为逃逸获得性免疫追杀而下调MHC消除抑制信号，NK细胞恰好可以通过某些激活信号杀伤靶细胞(missingself)(图1-b)。即使存在抑制信号，NK细胞也可以通过启动强激活信号通路，来激活NK细胞杀伤靶细胞(图1-c)。NK细胞直接通过肿瘤细胞表面富集的IgG抗体启动ADCC功能，直接杀伤肿瘤细胞，ADCC也是NK细胞杀伤靶细胞的主要方式(图1-d)。
图1NK细胞主要功能
由于和T细胞具有不同的机制，在肿瘤细胞试图通过下调MHCI复合物逃脱T细胞监控时，恰好就落入NK细胞的火力范围。当然，NK细胞也可以通过分泌细胞因子直接发挥抗肿瘤作用，或调动树突细胞、巨噬细胞和T细胞等免疫细胞共同参与到清除肿瘤细胞的过程。
鉴于NK细胞自身的作用机制，在肿瘤免疫治疗中，主要通过以下策略来促使NK细胞发挥最大的作用：1、免疫检查点抑制剂，解除NK细胞的抑制信号；2、激活NK细胞活性功能；3、靶向抗体治疗，通过ADCC来清除肿瘤细胞；4、细胞治疗。
为方便后文的理解，我们先浏览一下NK细胞主要配体和受体以及主要作用机理(表1所示)。
一、NK细胞——免疫检查点抗体
早在年，一个意大利科学小组发现，在进行骨髓移植治疗急性骨髓淋巴瘤病人时，KIR-MHCI不配对病人组，五年无复发存活率为%。但是在KIR-MHCI相匹配病人组中这一数据仅为25%。第一次在人体临床中证实了NK细胞对治疗肿瘤的重要作用。同时也让科学家想到，抑制KIR-MHCI的结合可能会对肿瘤有良好的治疗效果。
鉴于此，InnatePharma成了最早吃螃蟹的人，并在年开始使用KIR抗体治疗恶性血液癌。在年以总计4.4亿美元的高价将anti-KIR单抗(lirilumab)授权给了BMS做后期临床开发，随后BMS放手一搏，围绕lirilumab同时开展了七个临床试验(附表2)。然而在单独使用lirilumab治疗多发性骨髓瘤的二期临床试验中，并没有达到预期的效果。尽管如此，BMS仍然义无反顾的推进联合使用的临床试验，确信在联合使用中会收到更佳的疗效。不久之后，InnatePharma更以高达12.7亿美元的总价把靶向CD94/NKG2A的Monalizumab单抗转让给了阿斯利康，阿斯利康也不甘示弱，围绕Monalizumab同时开启了5项临床试验(附表3)。除NK细胞本身特异性受体外，还表达有其同T细胞共有的checkpointinhibitors(图2)，包括现在最火热的PD-1抗体。
图2CheckpointinhibitorsofNKcell
二、直接激活NK细胞功能
在肿瘤免疫中，最直接方案是直接激活NK细胞杀伤肿瘤细胞，其中NKG2D、NCR、CD和CD16为最常见激活NK细胞受体。
NCRs发现于上世纪九十年代，包括NKp30、NKp44、NKp46三种受体，在肿瘤细胞和健康组织中都有表达。其中NKp44仅在NK细胞被激活后才会表达，起到进一步放大信号的作用。
NKG2D广泛表达与NK细胞和CD8+T细胞，研究的也比较深入。NKL2D配体(NKG2DL)在健康组织细胞上几乎不表达，但是在快速复制的细胞，肿瘤细胞，以及被病毒细菌侵染细胞及其他变形老化细胞会表达并展示在细胞表面。肿瘤细胞表面的NKL2DL可以激活NK细胞，甚至使MHCI/KIR抑制信号失效。但是在肿瘤组织中，肿瘤细胞可以通过释放可溶性的NKL2DL中和NKL2D，帮助肿瘤逃脱NK细胞的监控。
在人体中CD16a主要在CD56dim亚型NK细胞表达。前面讲述过，NK细胞主要通过ADCC来清除肿瘤细胞，ADCC发动的机理则主要依赖抗体Fc和NK细胞表面的CD16a的结合。ADCC已成为抗体治疗肿瘤领域的主要作用机制，其中trastuzumab(anti-HER2)、cetuximab(anti-EGFR)或者rituximab(anti-CD20)就是典型的ADCC依赖型抗体。
在肿瘤组织中NK细胞的激活受体，会受到多种影响，为了进一步提高NK细胞对肿瘤细胞的特异性靶向杀伤，双特异性抗体成为优选策略。本文开始提到的Innatepharma和Sanofi合作的双特异性抗体就是其中之一，针对NK细胞靶点为NKp46。此外专注于双特异性抗体研发的Affimed公司也聚焦于NK细胞的抗肿瘤应用，其中用于治疗霍奇森淋巴瘤的AFM13主要通过同时靶向CD30×CD16a来聚集NK杀伤肿瘤细胞。
除此之外，还有诸多细胞因子参与激活NK细胞和促进NK细胞向肿瘤部位的迁移(图3)最为北京医院白癜风北京那有治疗白癜风医院
